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威斯騰公眾號

文庫構建服務
全長cDNA文庫構建

時間:2020-07-21 15:34:00 瀏覽:3821次



威斯騰生物提供高全長比例的文庫構建服務,全長比例可以高達85%以上。

操作流程

  • 客戶樣品QC,Total RNA的提取。
  • mRNA的分離。
  • 采用CAP Trapper法進行全長mRNA的富集。
  • 以mRNA為模板進行cDNA雙鏈的合成。
  • 對合成的cDNA雙鏈進行分級純化。
  • 將分級純化的cDNA與載體進行all-direct重組反應。
  • 將重組產物轉化DH10B感受態細胞。
  • cDNA文庫的QC。檢測文庫庫容量;每個文庫隨機挑取32個克隆子,PCR檢測檢測平均插入片段大小,陽性率; 隨機挑取24個克隆進行正向測序,通過NCBI的BLSTAX分析全長率。

送樣要求

針對每個文庫,客戶需提供至少能提取500ug總RNA的樣本,或者至少500ug的總RNA。

結果提供

我們提供構建好的cDNA文庫的甘油菌液(含20%甘油的LB培養基),隨機克隆子的PCR鑒定圖譜,24個克隆正向測序報告,文庫構建報告。

威斯騰實驗服務流程


威斯騰生物服務項目

分子生物學檢測 蛋白質與免疫學 動物實驗
實時熒光定量PCR 單克隆抗體制備 帕金森疾病模型
免疫共沉淀(Co-IP 多克隆抗體制備 抑郁癥動物模型
ELISA(酶聯免疫吸附法)技術 Western-blot 實驗服務 脊髓損傷模型
生化指標檢測 蛋白雙向電泳實驗服務 腦外損傷模型
雙熒光素酶報告基因檢測 原核蛋白表達純化 骨神經損傷模型
染色質免疫共沉淀(ChIP 真核蛋白表達純化 心肌缺血模型
GST pull Down ITRAQ定量蛋白質組學 心力衰竭模型
SLAC蛋白組學 肺動脈高血壓動物模型
高血壓模型
病毒包裝 實驗課題整體外包 粥樣動脈硬化模型
過表達/干擾慢病毒包裝純化 整體課題外包 大腦中動脈阻塞模型
過表達/干擾腺病毒包裝純化 細胞整體實驗外包 慢性之氣管炎模型
逆轉錄病毒包裝純化 動物整體實驗外包 過敏性哮喘模型
腺相關病毒包裝純化 肺炎大鼠模型
肝炎-肝硬化-肝癌模型
蛋白芯片 原代細胞培養 肝纖維化模型
細胞因子芯片 骨髓間充質干細胞培養 膽結石模型
BioPlex懸浮芯片 脂肪干細胞培養 急性胰腺炎模型
生長因子芯片 心肌成纖維細胞培養 急性腎衰竭模型
炎癥因子芯片 軟骨細胞培養 體內血栓模型
血管生成因子芯片 血管內皮細胞培養 關節炎模型
凋亡因子芯片 神經元細胞培養 I型和II型糖尿病模型
趨化因子芯片 內皮組細胞原代培養 裸鼠成瘤
HuProt TM 20K人類蛋白組芯片 基因編輯動物
電生理相關服務 動物整體實驗服務
膜片鉗實驗
細胞生物學檢測 高通量測序 代謝組學
細胞原代培養 mRNA測序 氣相色譜GC/MS
MTT檢測 LncRNA測序 液相色譜LC/MS
細胞凋亡檢測 全基因組測序 核磁共震NMR
細胞周期檢測 RNA-Seq測序
細胞克隆形成實驗 外顯子測序 影像學相關實驗
Transwell細胞遷移/侵襲 16s擴增子測序 Micro-CT
流式分選 Small RNA測序 小動物活體成像
CCK8/XTT檢測 宏基因組測序 核磁共振
臺盼藍檢測細胞活性 單細胞測序 PET-CT
藥物篩選細胞學實驗 circleRNA測序
細胞粘附性檢測 甲基化測序 基因編輯動物
細胞劃痕實驗 條件性敲除小鼠/大鼠
細胞生物學整體實驗 全基因敲除小鼠/大鼠
細胞成管實驗
病理檢測 CRISPR/Cas9細胞敲除/敲入 基因芯片
掃描電鏡 基因定點突變細胞系 LncRNA芯片
透射電鏡 單基因敲除細胞系 miRNA芯片
HE染色 多基因敲除細胞系 mRNA芯片
免疫組化 目的基因敲入細胞系 甲基化芯片(限人和小鼠來源樣本)
Tunel(原位末端凋亡法)檢測 報告基因敲入細胞系 SNP芯片(限人和小鼠來源樣本)
激光共聚焦 miRNA/LncRNA敲除細胞系
免疫熒光
Masson染色 CRISPR/Cas9動物敲除/敲入
原位雜交 基因敲除大鼠/小鼠
熒光原位雜交 基因敲入大鼠/小鼠
特殊染色(PSA、茜素紅、阿爾新藍等)
行為學檢測 藥物篩選服務項目 藥效學評價
曠場實驗 高通量自動藥物篩選平臺 抗腫瘤藥物藥效學評價
重復性刻板行為檢測 細胞高內涵藥物篩選平臺 心血管系統藥物藥效學評價
動物跑臺檢測 蛋白質組學靶標研發平臺 泌尿系統藥物藥效學評價
強迫游泳 分子藥理研究平臺 內分泌系統藥物藥效學評價
生物膜片鉗藥物篩選平臺 抗炎免疫藥物藥效學評價
常規藥物體外篩選

【本平臺合作項目】
分子生物學、細胞生物學、基因敲出/入、模式動物、SPF動物保種、病理學檢測、免疫學檢測、影像學檢測、原代培養、細胞藥篩、CRISPR/Cas9基因編輯、基因芯片、高通量測序、蛋白組學、代謝組學、高通量高內涵篩選、藥效學評價、藥理毒理學實驗、慢病毒包裝與穩轉株建立、SiRNA與納米載藥、ChIP、CO-IP、生物信息學分析、知識產權服務!
【全國免費熱線】400-675-6758
【電話】 023-65316016,023-65316556
【郵箱】 china-western@163.com
【官網網址】www.26720.com.cn
【地址】 重慶市高新區二郎創業大道高科創業園D棟2樓

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